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共 同 研 究 室 電 子 報 第八十五期 JAN.10.2021 |
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層光(Lightsheet)顯微影像技術平台
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過去進行定量PCR產物時,大多利用相對定量來確認目標基因的表現量,數位化核酸定量儀(Digital PCR)的出現可針對樣品中目標基因表現進行絕對定量,但是受限於兩種顏色,只能同時偵測兩種目標序列,隨著PCR 技術演進,近年也發展出多色數位化核酸定量儀(Digital PCR),本期電子報針對儀器做詳細的介紹。下一期電子報主題為「層光(Lightsheet)顯微影像技術平台」,敬請期待,並竭誠歡迎您訂閱共同研究室電子報以收取儀器介紹、研究新知、與每月訓練課程資訊,更歡迎您與我們聯絡,給予我們建議與鼓勵。
凱杰生物科技公司 Digital PCR為目前第三代的PCR系統,主要是利用poission分布原理稀釋樣本數,將樣本分配在上千上萬微小反應孔中,進行螢光偵測,來達到絕對定量目的。 Digital PCR在應用上比傳統PCR及qPCR來說具有多項優點,如高精準度,為絕對定量的系統、無需拉標準曲線、再現性高、對於PCR抑制物耐受性高。
QIAGEN QIAcuity 為一個全新設計的全自動digital PCR系統,可利用不同螢光標定之引子來辨識目標序列,最高可偵測5種螢光。本系統可應用於不同領域之研究,如Rare mutation, Copy number variation, Gene expression,並可在2個小時內即能拿到結果。
目前QIAcuity除了可以使用自行設計的引子外,廠商也提供針對gene expression,rare mutation, CNV設計好的引子。如下圖人類中常見的突變位點,結果QIAcuity都可以達到0.1%的靈敏度。
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第八十五期 JAN.10.2021 |