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胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)是細胞研究不可或缺的要素，它能提供必要的生長激素、脂質和其他養分以供細胞生長。此外，FBS也是配置許多研究試劑的重要成份。由於每一批次血清來自不同的牛隻個體，批次之間的品質也會存在差異，進而影響細胞實驗的結果之一致性。因此除了FBS的內毒素、血紅素、賀爾蒙等因子含量，批次內、批次之間的一致性也成為FBS品質的指標。

胎牛血清(FBS)來源認證

隨著胎牛血清的需求量攀升，加上牛隻具有狂牛症(Bovine Spongiform Encephalopathy, BSE)之潛在風險，為避免所使用的FBS參雜有不同產地、年齡、物種、添加物甚至疫區牛隻血清等魚目混珠的行為，FBS來源驗證更顯重要，本文介紹兩項常見之認證指標。

 (1).International Serum Industry Association (ISIA)

ISIA-國際血清工業聯合會，是非政府的第三方的公信組織。該機構致力於推動FBS的來源可追溯性(traceability)，針對牛隻的來源直到血清加工廠，每一個參與製程、上下游單位都堅持公開其完整資訊以進行審查，避免廠商用USDA grade、EU approved…等含糊地描述，以避免雜其他年齡(ex: calf serum)、動物之血清(ex: newborn calf serum, chicken serum, donkey serum)等魚目混珠的行為。而且該認證不得轉讓，效期僅三年，嚴格的審查機制的以保障血清的品質。

(2).ORITAIN

透過分析產品中動、植物來源的化學組成，ORITAIN得以建立產品的”指紋(fingerprint)”。由於動、植物會吸收其所在環境中的元素成為其組成分，且不同環境中所蘊含的元素、穩定同位素(stable isotope)會有差異，環境中¹⁸O和¹⁶O的比值、²H與¹H的比值，會因環境溫度、高度、降雨量等因素而有變化；而¹³C和¹²C、¹⁵N與¹⁴N的比值，則會因土壤品質、肥料、飼料等因素而改變。這項檢測技術運用在FBS時，可以透過分析氧(牛隻所吸的空氣)、碳(牛隻所在的土地、吃的草料)…等同位素的比值，判定FBS來源地以及是否有其他參雜成份。

上述認證，能確保研究者們拿到安全、品質穩定的FBS，因此特別提醒血清的使用者們，關注價格、品牌名稱之外，更建議在選購FBS時，注意是否經過相關認證。

FBS優良製程

FBS批次(lot-to-lot)、瓶(bottle-to-bottle)之間存在的營養、內毒素、顏色、沉澱物質等差異也是研究者常遇到的問題，以下就FBS製程說明能夠降低差異、得到優質血清的秘訣。首先，先以1至2天累積大量血液後進行血清分離，在取出血液的24小時內分離血清(raw serum)，確保能保存其中的養分，並且降低內毒素和血紅素的含量。其次，採用低溫製程(cold chain manufacture)，所有血清製程都在攝氏5度以下操作，能夠有效保存FBS裡對溫度敏感(heat sensitive)的養分、避免潛在微生物生長、維持FBS清澈無沉澱。此外，在進行血清最終過濾以及裝瓶的過程，在class 100 certified clean room中進行(即每立方公尺中最多100顆微粒)，並且使用一次性濾網耗材，避免使用不鏽鋼材質時有清潔劑或未清洗乾淨之其他物質殘留，導致FBS被汙染。過濾後的血清再次均勻混和再分裝，以達到瓶與瓶(bottle-to-bottle)間最小差異。

加熱去活性(heat inactivation)

此技術源自於1970年以前，當時被認為能夠使血清中的補體(complement)失去活性，或是使黴漿菌等汙染微生物失去活性，許多人視為必要操作步驟。但隨著血清製程的進步，加熱去活性的必要性大大降低，例如過去是使用0.45μm孔徑的濾網，偶有黴漿菌等汙染，但如今以使用0.1μm孔徑濾網，去除該疑慮。血清中補體成份的含量、實際對細胞培養的影響等亦有許多研究者進行了探討。此外，許多研究者在使用血清之前就會使用37°C加熱，此步驟足以使補體去活性。總結起來，以高溫進行的heat inactivation不僅非必要，更會影響血清中胺基酸、生長激素等珍貴養分。因此，除非有特殊實驗需求，否則不建議研究者進行加熱去活性(heat inactivation)的操作。

結語

希望藉由本文能給每位研究者在判定品質、選擇血清和應用上有新的觀念，以期在實驗上能夠有所裨益。

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