醫學研究部(Department
of Medical Research) |
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共 同 研 究 室 電 子 報 第四十八期 DEC.10.2017 |
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次世代定序技術於轉錄體研究
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自12月份起共同研究室次世代定序核心實驗室即將開始服務,本期電子報主要針對核心服務中毛細管核酸片段分析儀進行介紹,此設備在整個NGS建庫過程中是個不可或缺的好幫手,歡迎洽詢使用。下一期電子報將介紹次世代定序技術於轉錄體研究,敬請期待!並竭誠歡迎您訂閱共同研究室電子報以收取儀器介紹、研究新知、與每月訓練課程資訊。更歡迎您與我們聯絡,給予我們建議與鼓勵。
共同研究室流式細胞分析儀
(LSRII)委託操作部份網路預約系統已升級上線嘍!可即時預約,不分院內外,預約e指通,歡迎多加使用。已在線上申請委託者,請定期至「我的預約紀錄」查詢最新預約狀況!本月份「臺大醫學校區學術演講及研討會公告平台」將公告多場精彩演講及課程,歡迎同仁查詢使用,並踴躍申請帳號發佈訊息。希望我們所提供的設備對您的研究有所助益,服務品質也令您滿意,為了共研長期的經營運作,請您於發表文章時惠予致謝共同研究室,作為服務成效評鑑之用。
QSep100全自動毛細管核酸分析儀 醫學研究部 郭俊宏先生 Qsep100是一台由臺灣自行研發的全自動毛細管電泳核酸分析儀,採用創新的筆型預鑄膠體卡匣,以簡單的操作整合了傳統電泳的繁雜步驟:樣品準備、製膠、進樣、跑膠、照膠、結果判讀,一次完成,提供使用者快速、高解析、高靈敏的核酸分離結果。目前已經有5種卡匣可供選擇,可依照實驗需求抽換不同配方的卡匣;卡匣可室溫保存,隨插即用,不需人工注膠,省下繁瑣的準備時間並降低人為操做可能的失誤。分析軟體 Q-Analyzer簡單易上手,可以把實驗結果以報告的格式呈現出來,分析功能包含:Standard DNA/RNA QC、Smear Analysis、Peakcalling Analysis、NGS Library QC等。
儀器特點: 全自動上樣:以電動進樣的原理自動將樣本與Alignment Marker混合,無需手工操作。通量彈性:可單次分析單個樣品,也可96個樣品整盤上樣,不會有額外的耗材浪費。隨插即用式卡匣:無需制膠、灌膠,每支卡匣可分析100-300樣品。快速分析:2~7分鐘/樣品高靈敏度:可達pg等級高解析度:最佳可達4bp結果呈現:數位資料、毛細管電泳圖、凝膠成像圖上樣體積:一般PCR管子16uL~20uL,使用專用管子最低1uL。
應用實例: ■ NGS Library QC Qsep的分析軟體Q-Analyzer支援各式次世代定序應用,Library QC、Total RNA QC、Genomic DNA QC,計算平均片段長度,相對濃度定量等常見功能,提供完整的NGS解決方案。使用者可選定或自訂欲分析產物之上下界,即可得到Average bp、眾數、各區間所占百分比等資訊;此外也可檢查有無形成 adapter dimer。
■ cfDNA QC cfDNA有幾個重要的特性:平均長度約為170bp (<200bp)、不易保存、含量稀少。抽完cfDNA後,因為有可能同時也抽到Gemomic DNA,不能只用Qubit確認濃度,還需以確認樣本的Size,判斷使否能進行後續的實驗。因cfDNA濃度低,建議使用高靈敏的 N1, High resolution Cartridge進行偵測。
左圖是有抽到Genomic
DNA的cfDNA樣本,Genomic
DNA的部分會一起被列入濃度計算 ■ 分子輔助育種 親代的SSR重複數不同,如果是成功雜交的子代,該SSR區域的PCR產物在兩個allele會同時具有父代和母代的重複數,也就是會有兩種不同長度的產物;而如果發生自交的話則只會有單一種長度的產物。但這樣的PCR產物差異可能只有幾個bp,傳統的膠體電泳沒辦法區分這樣的差距,只能選擇利用核酸定序的方式確認。現在,我們可以利用毛細管電泳高解析的特性,清楚分辨產物重複數的差異,作為分子輔助育種的工具。
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第四十八期 DEC.10.2017 |