醫學研究部(Department
of Medical Research) |
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共 同 研 究 室 電 子 報 第122期 FEB.10.2024 |
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流式細胞臨床檢體收案與檢測標準化流程
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原位(In situ)組織基因表現分析通常是透過試劑或免疫染色法進行,然而礙於呈色方式的限制,最多只能同時觀察3至4個基因或蛋白,無法獲知多個基因的表現情況。Xenium是一個可針對多個標靶基因進行原位空間分析的平台,克服呈色的限制,讓同仁能夠同時對切片組織進行10至1000個RNA和蛋白質的研究,實現單細胞等級的高通量多體學分析,為基因表現研究提供更全面而深入的洞察。下一期電子報將介紹「流式細胞臨床檢體收案與檢測標準化流程」,敬請期待,並竭誠歡迎您訂閱共同研究室電子報以收取儀器介紹、研究新知、與每月訓練課程資訊,更歡迎您與我們聯絡,給予我們建議與鼓勵。
世基生物醫學公司 Xenium是個針對標靶基因進行高複合原位空間分析的高通量平台。可在同一組織切片中對10至1000個RNA和蛋白質,以細胞內解析度進行表現量分析和繪製原位空間基因表現圖譜,使研究人員們能夠對固定在Xenium玻片上的新鮮冷凍(Fresh Frozen)和石蠟包埋(FFPE)保存的樣本進行基因表現量的分析和數據視覺化 (圖1)。Xenium平台也包括Xenium Analyzer,是一種用於高通量分析的多功能儀器,具有處理影像數據、RNA和蛋白質訊號定位和執行二級分析的功能。Xenium原位空間基因表達解決方案為癌症、神經科學、發育生物學等領域研究提供RNA和蛋白質細胞內解析度有更深度的探討。
圖1 Xenium分析的第一步是將光學識別標誌解碼為轉錄體,由和螢光寡核苷酸雜交的擴增產物組成成像的循環(圖1)。在連續的循環中使得圖像能夠解碼,並確定螢光寡核苷酸在整個組織中轉錄體的空間位置。Xenium分析的下一步是細胞分割,其利用深度學習方法進行核的區分,然後進行擴展以推斷完整的細胞邊界(圖2)。分析工作流程的最後一步是將轉錄體分配給細胞並進行分群、降維和基因差異表達的二級分析。
圖2 應用 Xenium 原位基因空間表達平台是一個完整的端到端解決方案,使研究人員能夠對固定在 Xenium 載玻片上FF和FFPE保存的組織切片中的基因和蛋白質表達進行數據視覺化、量化和分析,亦能夠透過細胞內解析層級的高複合RNA和多種蛋白質的偵測來加深對健康和疾病組織的了解。 圖3.為應用於FFPE保存的人類侵襲性乳癌的轉錄體空間圖,透過DPAI染色界定細胞核邊界,並藉由擴大細胞核邊緣來估計細胞邊界,RNA轉錄體被分到特定細胞,並產生基因細胞矩陣。根據每個細胞的RNA含量和組成基因面板的標記基因,產生不同的細胞分群類型。例如FASN用於識別侵襲性腫瘤細胞,POSTN用於識別基質細胞。細胞根據其指定的細胞類型上色,從而產生藉由細胞類型識別的細胞空間圖及其對應的轉錄體。
圖3 醫學研究部Facebook專頁: https://www.facebook.com/ngs.ntuh
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